純化的外泌體濃度低

樣品中外泌體含量較少。

更換成外泌體含量較高的樣品，或濃縮樣品。

樣品用量較少。

增加純化體系中的樣品量，或擴大純化體系。

樣品反復凍融，外泌體破壞。

使用新鮮的樣品。

樣品保存條件不當。

樣品長期保存應置于-80 ℃。

樣品經過多次濾膜過濾。

減少樣品的過濾次數。

試劑盒過期。

使用保質期內的試劑。

磁珠凍存，吸附外泌體能力降低，甚至消失。

更換新的磁珠或試劑盒。

未按規定體積添加磁珠，磁珠用量減少。

按照純化體系要求，使用正確體積的磁珠。

未按照純化體系要求，隨意更改純化體系中各試劑比例。

按照純化體系要求，按比例添加試劑盒中的各成分到純化體系中。

未按照說明書操作。

孵育方式與洗脫強度等實驗操作請嚴格按照說明書進行。

磁珠與樣品孵育時間偏短。

延長孵育時間。

洗脫強度偏低。

增加Vortex強度，延長Vortex時間。

洗脫液體積偏大。

減少洗脫液體積。

提取的外泌體蛋白濃度低

純化的外泌體濃度較低。

參見上述解決方案。

裂解液裂解能力較弱。

使用裂解能力強的裂解液，或本公司生產的外泌體蛋白提取試劑盒（Ome-04）。

本試劑盒純化的外泌體純度高，幾乎不含雜蛋白。

增加外泌體濃度。

提取的外泌體蛋白中雜蛋白增多

樣品與磁珠孵育時間過長，導致雜蛋白非特異性吸附。

減少樣品與磁珠的孵育時間。

提取外泌體的樣品為濃縮后的樣品，雜蛋白含量較高。

減少提取外泌體時的樣品用量，或使用未濃縮的樣品。

提取的外泌體miRNA濃度低

外泌體濃度偏低

參見上述解決方案。

外泌體用量偏少

增加miRNA提取時每個樣品中的外泌體用量，或擴大miRNA提取體系。

RNA提取試劑盒不適合miRNA提取。

外泌體中RNA多為miRNA，且含量很低，請選擇微量RNA提取試劑盒，或選擇本公司生產的外泌體miRNA提取試劑盒（Ome-05）。

microRNA降解

樣品反復凍融或保存不當。

盡量使用新鮮的外泌體樣品。樣品應保存在-80 ℃，避免反復凍融。

耗材存在RNA酶污染。

選擇使用RNase-free的耗材，或將耗材進行RNase清除處理。

沒有在低溫環境下操作。

請在冰上或冰水混合物中提取microRNA。

microRNA洗脫液中含有RNase。

選擇使用RNase-free 的洗脫液或ddH₂O。

保存條件不當。

提取的microRNA盡快保存在-80 ℃，而不是-20 ℃。

microRNA濃度低

外泌體樣品用量較少。

增加樣品用量，或擴大microRNA提取體系。

樣品中外泌體濃度偏低。

使用濃度較高的外泌體樣本。

磁珠洗脫不充分。

延長震蕩時間，增加震蕩強度。

磁珠失效，無法吸附microRNA。

磁珠已過保質期，或被凍存過。

洗脫液用量較大。

減少洗脫液體積。

microRNA溶液渾濁

溶液中含有磁珠。

microRNA溶液，4 ℃，12, 000 g離心2 min，沉淀磁珠。或轉入磁力架，4 ℃靜置5 min，聚集磁珠。再轉移上清至新的EP管中，即可去除RNA溶液中的磁珠。