純化慢病毒滴度低

純化前的細胞培養上清中的慢病毒滴度較低

更換成慢病毒滴度較高的細胞培養上清，重新純化，或濃縮樣品。

含慢病毒的細胞培養上清用量較少

增加純化體系中慢病毒上清液用量，或擴大純化體系。

純化試劑過期

保證使用保質期內的試劑。

磁珠凍存，吸附慢病毒能力降低甚至消失

更換新的磁珠或試劑盒。

未按規定體積添加磁珠，磁珠用量減少

按照純化體系要求，正確使用磁珠。

未按照體系要求，隨意更改體系中各試劑比例

按照純化體系要求，按比例添加試劑盒中的各成分到純化體系中。

磁珠與慢病毒上清液孵育時間偏短

延長孵育時間。

洗脫強度偏低

增加Vortex強度，延長Vortex時間。

慢病毒上清液被微濾膜過濾，慢病毒減少

慢病毒上清液不使用濾膜孔徑為0.2和0.45 μm的濾器過濾，以及更小孔徑濾膜的濾器過濾。

純化的慢病毒溶液被微濾膜過濾，慢病毒減少

純化的慢病毒溶液不使用濾膜孔徑為0.2和0.45 μm的濾器過濾，以及更小孔徑濾膜的濾器過濾。請使用試劑盒提供的大孔徑濾膜過濾。

慢病毒上清液被高速離心，導致慢病毒減少

慢病毒上清液離心條件是：1,000 rpm（100 g），4℃，離心5 min，去除細胞碎片等雜質即可。

純化的慢病毒感染效率偏低

純化的慢病毒用量較少

增加純化的慢病毒用量。

Polybrene效率偏低

使用本公司的慢病毒感染增強試劑盒。

細胞密度偏大

慢病毒感染時，細胞密度控制在70%以下。

細胞狀態差

請使用狀態較好的對數生長期細胞做慢病毒感染。

純化的慢病毒反復凍融，導致活性降低

純化的慢病毒4℃保存，1個月用完。

慢病毒感染增強效果不顯著

慢病毒感染增強試劑過期

請查閱試劑生產日期，確保試劑在保質期內。

存儲不當導致感染增強試劑失效

試劑A與試劑C嚴禁凍存，否則失效。而試劑B長期保存在-80 ℃。

慢病毒滴度過低

純化慢病毒，或重新包裝慢病毒，提高慢病毒滴度。

慢病毒用量偏少

增加慢病毒用量。

細胞狀態不好

請選擇對數生長期細胞進行慢病毒感染實驗。

細胞密度過大

降低細胞密度。

細胞毒性大

感染增強試劑用量過大

按比例縮減感染增強試劑的用量。

慢病毒感染增強試劑添加不均勻

不要直接將慢病毒感染增強試劑添加到細胞培養液中，應該先與部分細胞培養液混合，再加入細胞培養板中。

細胞密度過低

提高感染時細胞密度。

細胞狀態較差

請使用生長狀態良好的細胞做慢病毒感染。

細胞株特異性。

對于慢病毒感染增強試劑，懸浮細胞一般比貼壁細胞敏感，原代培養細胞比細胞株敏感。在敏感細胞株中，按比例減少各試劑用量。